產(chǎn)品名稱：人谷氨酸脫羧酶           
英文名稱： Human glutamic acid decarboxylase,GAD ELISA KIT

性狀：液體     
適應(yīng)癥：科研     
規(guī)格：96人份/48人份     
貯藏：2-8℃     
檢測(cè)方法：ELISA酶聯(lián)免疫     
產(chǎn)品用途: For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù).
試劑器材
　　1.　試劑
　　（1）　包被緩沖液（PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液）:
　　　　NaCO31.59克　NaHCO3　 2.93克　　加蒸餾水至1000ml　　
    （2）　洗滌緩沖液（PH7.4 PBS）：0.15M　KH2PO4 0.2克　Na2HPO4?12H2O　2.9克　NaCl  8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05％ 0.5ml 加蒸餾水至1000ml
　　（3）　稀釋液:牛血清白蛋白（BSA） 0.1克　加洗滌緩沖液至100ml　或以羊血清、兔血清等 血清與洗滌液配成5～10％使用。
　　（4）　終止液（2M H2SO4）：蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98％）21.7ml。
　　（5）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:0.2M Na2HPO4（28.4克／L） 25.7ml　0.1M 檸檬酸（19.2克／L） 24.3ml　加蒸餾水50ml。
　　（6）　TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:TMB（10mg／5ml無水乙醇） 0.5ml底物緩沖液（PH5.5） 10ml0.75％H2O2　32μl
　　（7）　ABTS使用液:ABTS　0.5mg　底物緩沖液（PH5.5） 1ml　3％H2O2　2μl
　　（8）　抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。
　　（9）　正常人血清和陽性對(duì)照血清。
　　2.　器材:
　　（1）　聚苯乙烯塑料板（簡(jiǎn)稱酶標(biāo)板）40孔或96孔，ELISA檢測(cè)儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。
　　（2）　小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
　　（3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。
注意事項(xiàng)
　　1.　正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
　　2.　在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:
　　（1）　固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
　　（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。
　　（3）　酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
　　（4）　酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

相關(guān)產(chǎn)品：

人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白試劑盒 Human eosinophil cationic protein,ECP ELISA KIT
人血漿抗凝蛋白S 試劑盒  Human plasma anticoagulant protein S,PS ELISA KIT
人血漿抗凝蛋白C 試劑盒  Human plasma anticoagulant protein C,PC ELISA KIT
人免疫球蛋白G Fc片段試劑盒 Human Fc region of immunoglobulin G,Fcγ ELISA KIT
人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B 試劑盒  Human cyclophilin B,CyPB ELISA KIT
人C4結(jié)合蛋白試劑盒 Human C4 binding protein,C4BP ELISA KIT
人補(bǔ)體片段3c 試劑盒 Human Complement fragment 3c,C3c ELISA KIT
人補(bǔ)體7 試劑盒 Human Complement 7,C7 ELISA KIT
人β淀粉樣蛋白1-42 試劑盒 Human amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA KIT
人chemerin  試劑盒  Human chemerin ELISA KIT
人凝血因子Ⅻ 試劑盒  Human coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA KIT
人凝血因子ⅩⅢ 試劑盒 Human coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA KIT
人凝血因子Ⅲ 試劑盒 Human coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA KIT
人補(bǔ)體1q 試劑盒 Human Complement 1q,C1q ELISA KIT
人血小板膜糖蛋白Ⅳ 試劑盒 Human plaet membrane glycoprotein Ⅳ,GP-Ⅳ ELISA KIT
人胸腺肽α1 試劑盒  Human Thymosin α1 ELISA KIT
人補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白試劑盒  Human complement control protein,CCP ELISA KIT
人血小板堿性蛋白試劑盒  Human plaet basic protein,PBP ELISA KIT
人類白細(xì)胞抗原C 試劑盒 Human leukocyte antigen C,HLA-C ELISA KIT
人類白細(xì)胞抗原E 試劑盒 Human leukocyte antigen E,HLA-E ELISA KIT
人類白細(xì)胞抗原A 試劑盒 Human leukocyte antigen A,HLA-A ELISA KIT
人血清淀粉樣蛋白P 試劑盒  Human Serum amyloid P,SAP ELISA KIT